熒光定量PCR技術(shù)，是通過(guò)在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)驗(yàn)采用兩種定量方式，即定量和相對(duì)定量。熒光定量PCR可用于mRNA表達(dá)量水平檢測(cè)、MicroRNA表達(dá)量水平檢測(cè)和基因拷貝數(shù)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)的方法可分為SYBRGreenI法和TaqMan探針?lè)ā?br />　　
　　熒光定量PCR就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，通過(guò)熒光信號(hào)，對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期，模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，所以成為定量的依據(jù)。由于熒光定量PCR的眾多優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)，并成為基因表達(dá)差異和文章發(fā)表*的部分。熒光定量PCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測(cè)，很多沒(méi)有做過(guò)熒光定量PCR的研究者常常感到高深莫測(cè)，不知從何入手；甚至一些做過(guò)一些實(shí)驗(yàn)的研究者也會(huì)對(duì)數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時(shí)候，盡管知曉qPCR的原理和基本操作，仍然浪費(fèi)時(shí)間和精力，而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
　　
　　服務(wù)要求
　　
　　需提供新鮮或保存完好的細(xì)胞（至少5×106）、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料；或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性好）或總DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之間，完整性好）；或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl（反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好，純度在1.9-2.1之間）；同時(shí)提供待測(cè)基因序列或登錄號(hào)。
　　
　　報(bào)告內(nèi)容
　　
　　總RNA(或DNA)濃度，電泳圖片，擴(kuò)增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析（可選），實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及剩余引物和模板（信諾金達(dá)可保存1個(gè)月）